Кориметрийн арга - судалсан болон мэдэгдэж буй бодисын өнгөний ханалтыг харьцуулсан шинжилгээнд үндэслэсэн шинжилгээ. Физик болон химийн шинжилгээний үр дүн нь шинжлэх ухааны олон салбарт маш их ач холбогдолтой боловч ихэнх судалгааг анагаах ухаанд ашигладаг.
Колориметрийн аргын мөн чанар
Бодисын химийн найрлагыг тодорхойлох олон төрлийн туршилтууд байдаг. Тэдгээрийн зарим нь бүх нийтийнх бөгөөд янз бүрийн салбарт өргөн хэрэглэгддэг, зарим нь тодорхой, өндөр нарийвчлалтай байдаг. Колориметрийн арга нь бүх нийтийнх.
Шинжилгээний мөн чанар нь тодорхойгүй концентрацитай уусмалын өнгөний ханалтыг стандарт уусмалын өнгөтэй харьцуулсанд оршино. Шинжилгээний явцад судлагдсан бүрэлдэхүүн хэсэг нь тодорхой урвалжтай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд өнгөт нэгдэл үүсдэг. Урвал дууссаны дараа үүссэн сүүдрийг концентраци нь аль хэдийн мэдэгдэж байгаа уусмалын өнгөтэй харьцуулна.
Өнгө хэмжигдэхүүнийг үндэслэгч нь Роберт Бойл гэж үздэг. Тэр шахалт ашигласануусмал дахь төмрийг зэсээс ялгах таннин. Уусмал дахь төмрийн концентраци их байх тусам сүүлчийнх нь өнгө аястай болохыг Бойл анзаарсан.
Colorimetry
Өнгө хэмжигдэхүүн нь уусмал дахь бодисын хэмжээг тодорхойлох арга юм. Шинжилгээ нь Бугер-Ламберт-Беэрийн хууль дээр суурилдаг: гэрлийн туяа нь бодисын нягт шингээгч давхаргад хүрэхэд түүний эрчим сулардаг.
Бодисын концентрацийг тодорхойлох колориметрийн арга нь өнгөний эрчмийг хэмжихийн тулд тусгай багаж ашиглан харааны харьцуулалт эсвэл харьцуулалтыг ашиглаж болно. Харьцуулалт нь шууд бөгөөд нөхөх байдлаар хийгдсэн.
- Шууд. Энэ арга нь шингэний тодорхой нягтрал, температур дахь туршилтын уусмалын өнгөний түвшинг жишиг уусмалтай харьцуулах явдал юм. Фотоколориметр ба спектрофотометрийг ашиглахдаа нэрмэл усыг жишиг уусмал болгон ашигладаг. Төхөөрөмжүүд нь гэрлийн эрчмээс хамаарах гүйдлийн эрчмийг хэмждэг.
- Нөхөн төлбөр. Энэ арга нь судалсан дээжийн өнгийг лавлагаа болгон авчрахад суурилдаг. Үр дүнд нь уусгагч нэмэх эсвэл будсан орчны давхаргын өндрийг нэмэгдүүлэх замаар хүрнэ.
Спектрофотометр, монохроматор болон бусад нарийн багаж хэрэгслийг ашиглах нь судалгааны аль хэдийн энгийн аргыг илүү хялбарчилж, үр дүнгийн нарийвчлалыг нэмэгдүүлэх боломжийг олгодог. Эдгээр төхөөрөмжүүд нь гэрлийн дамжуулалтын хэмжээг хэмжиж, долгионы уртыг тодорхойлох чадвартай.
Шинжилгээг хаана хийдэг
Химийн найрлага нь тодорхой, харьцуулах жишиг дээж байгаа, сорьц болон жишиг дээжийн температур ижил байвал колориметрийн шинжилгээний аргыг хэрэглэнэ. Хэрэв та өнгөт бодисын хэмжээг хурдан тодорхойлох шаардлагатай боловч энэ нь маш бага тул аналитик аргыг хэрэглэх боломжгүй.
Кориметрийг анагаах ухаанд эмнэлзүйн биохимийн судалгаа болон бусад чиглэлээр өргөнөөр ашигладаг:
- эмийн үйлдвэр;
- хүнс, архины үйлдвэр;
- агроном зүй (хөрсний чанарыг тодорхойлох).
Давуу болон сул тал
Өнгө хэмжилтийн арга нь бусадтай адил давуу болон сул талуудтай.
Давуу талуудад дараах зүйлс орно:
- шинжилгээ хийхэд хялбар, хамгийн бага бэлтгэл журам;
- бага хэмжээний сорилтын материалаар ч шалгах боломж;
- хямд биш орчин үеийн төхөөрөмжүүд сүүлийн үед их хэрэглэгдэх болсон ч үнэтэй тоног төхөөрөмж хэрэггүй. Гэхдээ тэд хамгийн зөв үр дүнг өгдөг.
Сул тал: аналитик аргуудтай харьцуулахад шинжилгээний нарийвчлал бага.
Уураг тодорхойлох биурет арга
Цусны сийвэн дэх уураг нь гомеостазын төлөв байдлыг илэрхийлдэг үзүүлэлт юм. Цусан дахь макромолекулын нэгдлүүдийн агууламж нэмэгдэхийг гиперпротеинеми, бага агууламжийг гипопротеинеми гэнэ.
Уураг дахьцусны ийлдэс нь өөр өөр бүтэц, бүтэц, шинж чанартай, өөр өөр функцийг гүйцэтгэдэг. Эдгээр нь фермент, гормон, иммуноглобулин болон бусад зүйлд хуваагддаг. Бүх бүлгийн уургууд нь хэд хэдэн нийтлэг шинж чанартай байдаг бөгөөд эдгээрийн үндсэн дээр биологийн шингэн дэх макромолекулын органик нэгдлүүдийг тодорхойлох аргыг боловсруулсан болно.
Эмнэлзүйн биохимийн бүх аргуудаас уураг тодорхойлох колориметрийн аргыг ихэвчлэн ашигладаг. Тэд харьцангуй хямд байдаг нь төсвийн байгууллагуудад чухал ач холбогдолтой юм. бөгөөд маш энгийн. Хамгийн түгээмэл нь биурет арга юм. Аргын мөн чанар: шүлтлэг орчинд уураг нь зэсийн сульфаттай урвалд орж, нил ягаан өнгийн нэгдлүүдийг үүсгэдэг. Цусан дахь уургийн агууламжийг будгийн ханалтаар тодорхойлно. Шинжилгээний биоматериалыг өглөө өлөн элгэн дээрээ авна.
Шинжилгээ нь өндөр нарийвчлалтай боловч цусан дахь уургийн концентрацид нөлөөлдөг хүчин зүйлүүд байдаг:
- биоматериалын дээж авахын өмнөхөн биеийн хөдөлгөөн;
- жирэмсний болон хөхүүл үеийн сүүлийн долоо хоногууд;
- кортикотропин, Мисклерон, клофибрат эм хэрэглэх нь цусан дахь уургийн агууламжийг нэмэгдүүлж, пиразинамид, эстроген хэрэглэх нь концентрацийг бууруулах;
- биоматериалын дээж авах үед гарын буруу байрлал.
Төмөр тодорхойлох
Цусан дахь төмрийн хэмжээ нь янз бүрийн өвчнийг оношлох гол үзүүлэлтүүдийн нэг юм. Уг бодис нь гемоглобинд төвлөрдөг бөгөөд энэ нь эд эсэд хүчилтөрөгч тээвэрлэх боломжийг олгодог. Учир ньтөмрийг колориметрийн аргаар тодорхойлоход гол урвалж болгон ихэвчлэн батофенантролины уусмал (0.02%) ашигладаг. Биоматериал - цус задралын ул мөргүй ийлдэс.
Аргын мөн чанар: төмрийн ион ба сульфатжуулсан батофенантролины харилцан үйлчлэл нь өнгөт цогцолбор үүсгэдэг бөгөөд ханалтыг фотометрээр тодорхойлно. Тодорхой шийдлийг олж авахын тулд биоматериалаас дээж авах дүрмийг дагаж мөрдөх шаардлагатай боловч төмрийн-лигандын нэгдлүүдийн оптик нягтыг нарийн тодорхойлохын тулд гидроксиламин ба угаалгын нунтаг (натрийн додецил сульфат) ашиглан төмрийг гемоглобиноос ялгаруулдаг. Туршилтын үр дүн нь эмгэгийн байдал, зэргийг тодорхойлдог. Төмрийн хэвийн концентраци: байх ёстой.
- 14, 2 – 26.0 мкмоль/л (эрэгтэй);
- 10, 6- 21, 7 мкмоль/л (эмэгтэйчүүд).
Төмрийн дутагдал нь ихэвчлэн цус алдах, хоол хүнсээр дутуу хэрэглэх, ходоод гэдэсний замаас шингээлт муутай холбоотой байдаг.
Холестерины шинжилгээ
Холестерин нь хүний гэлтгүй олон организмын эсийн хананд агуулагддаг органик бодис юм. Энэ нь холекальциферол болон стероидын даавар үйлдвэрлэхэд зайлшгүй шаардлагатай. Холестерины хэмжээ 3.37-5.2 ммоль / л байвал хэвийн гэж үзнэ. Өндөр агууламж нь атеросклерозын гол шалтгаануудын нэг юм.
Холестериныг тодорхойлох колориметрийн аргууд нь судасны өвчнийг эрт үед нь таних боломжийг олгодог. Эмгэг анатомийн үр дүнгээс үзэхэд ишемийн үхлийн үр дагавар, өвчтөнд липофилийн спиртийн концентраци.6.5-7.8 ммоль/л байсан.
Колориметрийн аргын зарчим нь холестериныг 3бета-гидрокси-стероид оксидоредуктазагаар исэлдүүлэн устөрөгчийн хэт ислийг ялгаруулж, р-аминотипириныг өнгөт нэгдэл болгон хувиргадаг. Холестерины агууламжийг өнгөний ханалтаар тодорхойлно.
Хүүхдэд шинжилгээ хийхдээ бага насны холестерины концентраци 4.1 ммоль / л-ээс хэтрэхгүй байх ёстой.
Ферментийн колориметрийн арга гэж юу вэ?
Ферментийн шинжилгээ нь өндөр идэвхжилтэй ферментийн урвалыг ашиглахад суурилдаг. Тэдгээрийг нитратын ионоос эхлээд макромолекул хүртэл янз бүрийн бодисыг тодорхойлоход аналитик химийн салбарт өргөн ашигладаг.
Ферментийн (ферментийн) аргууд нь өвөрмөц бөгөөд найрлагатай ижил төстэй бусад бодисуудтай хамт тодорхой бодисыг шинжлэх боломжийг олгодог. Ферментийн хэрэглээнд суурилсан хамгийн түгээмэл аргууд нь глюкозын оксидаз юм. Энэхүү шинжилгээ нь цусан дахь глюкозын концентрацийг тодорхойлоход хэрэглэгддэг. Туршилтын нарийвчлал нь 2-р хэлбэрийн чихрийн шижинтэй өвчтөнд гипогликемийн эмийн тунг тохируулахад ашиглах боломжийг олгодог.
Глюкозын исэлдүүлэгч аргыг глюкозыг тодорхойлох хамгийн сайн тоон аргуудын нэг гэж үздэг. Цус (хялгасан судас) болон ийлдсийг хоёуланг нь биоматериал болгон ашиглаж болох ч гематокрит багатай тул плазмыг илүүд үздэг бөгөөд энэ нь үр дүнгийн нарийвчлалд сөргөөр нөлөөлдөг.
Фотометрийн кинетик аргыг голчлон ашигладаг. Үүний мөн чанар нь үүнд оршдогглюкозын оксидаза ба пероксидазын тогтоосон харьцаа, урвал эхэлснээс хойш тодорхой хугацааны дараа өнгөт нэгдэл үүсэх хурд нь дээж дэх глюкозын түвшинтэй тохирч байх болно. Туршилтын гол давуу тал нь дээжинд гуравдагч этгээдийн нэгдлүүд байгаа нь үр дүнд нөлөөлөхгүй байх явдал юм. Энэ арга нь бас сул талтай - туршилтанд Герман эсвэл Шведийн үйлдвэрлэгчдийн үнэтэй хэмжих хэрэгсэл шаардлагатай.
Дүгнэлт
Колориметрийн арга нь үнэн зөв бөгөөд хэрэглэхэд хялбар. Анагаах ухаанд хэрэглэх нь биеийн янз бүрийн эмгэг өөрчлөлтийг эрт илрүүлэх боломжийг олгодог. Шинэ технологи нэвтрүүлснээр арга нь сайжирч, улам бүр түгээмэл болж байна.
